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在生物医学超微结构观察中,透射电镜是必不可少的技术手段。样品制备作为其中关键的一环,周期长且过程复杂,取材作为样品制备的第一步,其操作成功与否直接关系到整个实验的成败。现将取材过程中应该注意的问题总结如下,如果因取材不规范导致的实验失败,本公司概不负责!
取材注意事项
悬液置于1.5 ml 尖头EP管中离心,一般为1000 rpm,3-5 min(具体转速及时间根据细胞种类不同稍有不同,但以不破坏细胞结构为前提)。离心之后保证细胞饼为绿豆或者米粒大小,或者在尖头EP管中高度为3-4 mm即可(细胞量至少为106,但也不要过多),吸去上清,沿管壁慢慢加入1 ml 2.5%的戊二醛固定液(4℃),切记不要将细胞饼吹散。4℃保存2h或者过夜。
固定液注意事项:
戊二醛母液务必选用电镜专用的,之后用0.2 M的磷酸缓冲液将母液配成2.5%,PH为7.3-7.4,4℃避光保存。