产品信息
【产品名称】
通用名称：核酸提取试剂
商品名称：磁珠法细菌、真菌 RNA 提取试剂盒
【包装规格及适配提取仪型号】
预分装
非预分装
16 T
96 T
20 T
100 T
500 T
NanoMagBio S-16
√
√
NanoMagBio S-48
NanoMagBio N-96
√
【预期用途】
用于高通量全自动化核酸的提取、富集、纯化等步骤，其处理后的
产物用于科研应用。
【提取原理】
本试剂盒是基于高特异结合力生物纳米磁珠的核酸提取试剂盒，
主要原理是利用功能性生物磁珠表面的功能基团，将核酸从样品裂解
产物中富集至磁珠表面，并经洗涤液去除蛋白质和其他杂质，再利用磁
性分离装置对磁珠进行分离，然后经 DNase I 消化去除 DNA，从而快
速分离纯化 RNA。整个过程不需要用到苯酚、氯仿和 β-巯基乙醇等有
害物质，安全无毒，并且利用具有顺磁性的生物纳米磁珠，适合高通量
自动化提取，提取产物可直接用于 RT-PCR、qRT-PCR、芯片分析、二
代测序建库、Northern Blot 和分子克隆等下游实验。
【主要组成成分】
序号
货号
NMR0611
-16
NMR0611
-96
NMR0611
-20
NMR0611
-100
NMR0611
-500
规格
16 T
预分装
96 T
预分装
20 T
非预分装
100 T
非预分装
500 T
非预分装
1
裂解液
15 mL
70 mL
15 mL
70 mL
350 mL
2
结合液
96 孔板×1
96 孔板×1
10 mL
50 mL
250 mL
3
洗涤液 I
96 孔板×1
15 mL
75 mL
370 mL
4
磁珠-洗涤液 II 96 孔板×1
15 mL
75 mL
370 mL
5
洗涤液 II
96 孔板×1
15 mL
75 mL
370 mL
6
洗脱液*
96 孔板×1
4 mL
20 mL
60 mL
2 mL
2 mL
7
DNase I
80 μL
220 μL*2
80 μL
220 μL*2
1 mL*2
8
DNase I Buffer
2 mL
12.5 mL
2.5 mL
12.5 mL
60 mL
9
NCY 试剂
400 μL
1 mL*2
400 μL
1 mL*2
1 mL*10
10
蛋白酶 K**
400 μL
1.2 mL*2
400 μL
1.2 mL*2
1.2 mL*10
11
***
溶菌酶、葡聚糖酶、几丁质酶、真菌破壁酶
*注：预分装试剂 96 孔板已预装 50 μL 的洗脱液，并备 1 支洗脱液用于
分光光度计测定浓度时的空白校准。
**注：选配试剂；主要针对细菌样本。
***注：自备试剂；酶消化处理时针对难提细菌、真菌类型需要自备。
【储存条件及有效期】
DNase I 和 NCY 试剂：-20 ℃保存，干冰或湿冰运输。
DNase I Buffer：4 ℃或-20 ℃保存，湿冰运输。
其他试剂：常温（10-30 ℃）保存和运输。如低温下试剂有沉淀析出，
请将试剂在 65 ℃烘箱放置 30 min 左右，混匀澄清后使用。注意，放进
烘箱的试剂请保持密封状态，预分装试剂不要撕开铝膜。
有效期：试剂盒有效期 12 个月。
【适用样本类型】
样本类型
适用种类
培养型
革兰氏阳性菌
肺炎链球菌、金黄色葡萄球菌
革兰氏阴性菌
大肠杆菌、肺炎克雷伯菌
真菌
曲霉、各类蘑菇、金耳、银耳
酵母菌
毕赤酵母、酿酒酵母、白色念珠菌
环境型
土壤
塘泥、河泥、湖泥、海底泥
水体
塘水、河水、湖水、海水等水体滤膜收集样本
【实验前准备】
DNase I 工作液配制
根据样品数量，配制相应体积的 DNase I 工作液（每个反应配制用
量见下表），分装到相应工位的 96 孔板（自动提取）中或者置于冰上
待用（手工提取）。DNase I 工作液现配现用，避免酶活性丧失。
试剂
每个反应用量
DNase I
4 μL
DNase I Buffer
96 μL
溶菌酶工作液配制
根据样品数量，配制相应体积的溶菌酶工作液，每份样品需要 100
μL 溶菌酶工作液。称取溶菌酶干粉，加入 RNA 专用的 1× PBS 缓冲液
或未开封的 1× PBS 缓冲液，至工作液终浓度为 20 mg/mL。充分振荡混
匀后放置在冰上待用，溶菌酶工作液应现配现用，避免酶活性丧失。
【培养型细菌样本裂解】
1. 收集菌液样本：离心收集约 1-3 mL 培养的细菌菌液，细菌收集过多
不利于裂解，会导致裂解效果不佳影响提取 RNA 的纯度。
2. 酶消化预处理：完全弃掉培养基后加入 100 μL 溶菌酶工作液，用移
液器吸打混匀或振荡器振荡混匀。37 ℃静置，革兰氏阳性菌：15-60
min，革兰氏阴性菌：5-30 min。
3. 裂解液裂解：酶消化完成后，加入 500 μL 裂解液，20 μL NCY 试剂，
针对较难裂解的细菌可再加入 20 μL 蛋白酶 K，在振荡器上充分振荡
混匀，然后室温消化 10-30 min。
4. *可选步骤，针对较难裂解的细菌类型，如肺炎克雷伯菌，可以加入
0.1-0.5 mm 规格的玻璃珠进行研磨操作。研磨操作推荐使用纳磁金属
浴（货号：MB-70）设置 3000 rpm、4 ℃运行 30 min。无该金属浴可
在振荡器上持续振荡 10 min 以上，或使用自动研磨仪（推荐纳磁研
磨仪，货号：RFG-192，可设置-20 ℃低温研磨程序减少 RNA 降解）
设置 60 Hz，30 s 运行、30 s 暂停重复 10 次。
5. 裂解完成后，进行 4 ℃，12000 rpm 离心 10 min。若使用 96 孔板进行
高通量提取，孔板离心机设置 4 ℃，4000 rpm 离心 10 min。