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产品简介:
qPCR MasterMix with UDG (Probe)结合了最新的缓冲体系技术和抗体修饰的热启动 Taq 酶,确保快速、高特异性和高灵敏度的实时荧光PCR 检测,同时加入了UDG防污染体系,有效防止气溶胶污染。本试剂适用于探针法检测。
qPCR MasterMix with UDG (Probe)包含除了引物,探针和模板以外,所有实时荧光定量 PCR 的必要组分。
PCR 反应液配制(以 20μl 为例)
成分
体积
浓度
qPCR MasterMix with UDG (Probe)
10μl
1×
10μM Forward Primer *1
0.4μl
0.2 μM
10μM Reverse Primer*1
0.4μl
0.2 μM
10μM Probe*2
0.4μl
0.1-0.5 μM
模板*3
as required
-
H2O(RNase free)
up to 20μl
-
*1 通常引物终浓度为 0.2 μM 可以得到较好结果。反应性能较差时,可以在 0.1~1.0μM 范围内调整引物浓度。
*2 探针浓度与使用的 Real Time PCR 扩增仪、探针种类、荧光标记物质种类有关,实际使用时请参照仪器说明书,或各荧光探针 的具体使用要求进行。一般可在0.1-0.5 μM之间调整。
*3 模板使用量依据具体实验而定,cDNA一般不超过体系总体积的1/10。
PCR 扩增条件:
Step
Temp
Time
Cycles
UDG pre- treatment
25℃
10min
1
Polymerase activation
95°C
2min
1
Denaturation
95°C
10s
40
Annealing*4
60°C
30s