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由可以发出绿色荧光的DNA结合染料吖啶橙(AcridineOrange,简称AO)和可以发出红色荧光的DNA结合染料碘化丙啶(Propidiumiodide,简称PI)组成。其中AO可以通过完整的细胞膜,嵌入所有细胞(活细胞和死细胞)的细胞核,呈现绿色荧光:PI只能通过不完整的细胞膜,即死细胞的细胞膜,嵌入所有死细胞的细胞核,呈现红色荧光。当两种染料均存在干细胞核内,在合适的A0、PI配比下,两种染料发牛能量共振转移,死细胞在绿色通道下(EX:525/30.EM:600LP)激发出红色荧光。由于AO和PI为DNA结合染料,因此可有效排除杂质以及红细胞的干扰,确保对样品进行准确计数。