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红色荧光蛋白大肠杆菌(用于观察和表达的)
1 简要介绍
菌种名 红色荧光蛋白大肠杆菌
拉丁名Escherichia coli
编号基因型RFP
特征 骨架质粒为 pET28a,多克隆位点插入 RFP 开放性阅读框,可表达红色荧光蛋白。
保存 含 30%甘油菌液放于-80 度可长期保存
培养基 LB 培养基(含 50ug/mL 的 kana)
用途:用于表达红色荧光蛋白
2 诱导方法
(1)LK 液体培养基配方:胰蛋白胨(Tryptone) 10g/L 酵母提取物(Yeast extract) 5g/L 氯化钠(NaCl)
10g/L , 50ug/mL Kana,pH7.4
(2)用接种环接种至 3mLLK 液体培养基中 37 度,220rpm 过夜培养至饱和。
(3)按照 10%的接种量接种至 100 mL LK 培养基中 37 度培养至 OD600=0.50,加入 1ml 100mM IPTG
溶液,继续培养 4 小时。
(4)12000rpm,离心 5min,收集菌体。
1 简要介绍
菌种名 红色荧光蛋白大肠杆菌
拉丁名Escherichia coli
编号基因型RFP
特征 骨架质粒为 pET28a,多克隆位点插入 RFP 开放性阅读框,可表达红色荧光蛋白。
保存 含 30%甘油菌液放于-80 度可长期保存
培养基 LB 培养基(含 50ug/mL 的 kana)
用途:用于表达红色荧光蛋白
2 诱导方法
(1)LK 液体培养基配方:胰蛋白胨(Tryptone) 10g/L 酵母提取物(Yeast extract) 5g/L 氯化钠(NaCl)
10g/L , 50ug/mL Kana,pH7.4
(2)用接种环接种至 3mLLK 液体培养基中 37 度,220rpm 过夜培养至饱和。
(3)按照 10%的接种量接种至 100 mL LK 培养基中 37 度培养至 OD600=0.50,加入 1ml 100mM IPTG
溶液,继续培养 4 小时。
(4)12000rpm,离心 5min,收集菌体。