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糖基化是指蛋白质在酶的作用下将糖链连接到蛋白质特定氨基酸形成糖苷键的过程。细胞内超过 50% 的蛋白质都有一个或多个糖链。连接于天冬酰胺（Asn）残基上的N-糖基化在真核生物中广为存在，也是研究最为深入的一种糖基化形式。N-糖基化具有重要的生物学功能，在细胞核内调节转录和信号传导；在细胞内可作为营养感受器；在分泌途径中，内质网启动的糖基化类型参与蛋白质折叠、稳定和运输；在细胞表面，调节蛋白稳定性或活性、提供细胞粘附的接触点，调节受体的配体特异性或亲和力、调节受体二聚化和信号传导；在细胞-细胞粘附和通讯中起作用；介导细菌宿主相互作用，如初始附着和入侵、定植。
N-糖基化蛋白质组首先对蛋白质进行酶解，随后利用凝集素（lectin）富集N-糖基化肽段，再用N-糖酰胺酶（PNGase）在重水中切除糖链，发生N-糖基化的天冬酰胺残基分子量增加2.989Da，利用质谱可测定分子量是否发生对应的质量偏移，从而检测N糖基化修饰及位点。