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产品概述
NOVA® T4 DNA Ligase (FAST) 由携带T4 噬菌体gene 30 的大肠杆菌产生。该酶催化双螺旋DNA 或RNA之间的5’-磷酸基团和3’-羟基之间形成磷酸二酯键。该酶在双链DNA、RNA 或者DNA/RNA 复合物间可修复单链缺刻, 并且可以连接有粘性末端或者平末端的DNA 片段,但对于单链核酸无活性。T4 DNA Ligase (Fast) 需要 ATP作为辅助因子,在室温下完成粘性末端连接反应仅需10分钟。
应用
• 限制性内切酶酶切产物DNA 片段的克隆;
• PCR 产物的克隆;
• 双链寡核苷酸接头或配体与DNA 的连接;
• 基因定点突变;
• 扩增片段长度多态性(AFLP)。
• 修复双链DNA 缺刻。
• 线性 DNA 自环化。
活性定义
在37℃条件下, 1 Weiss unit 的酶在20min 内催化1nmole 的[32PPi]转变为活性炭吸附态。1 Weiss unit 等同于约200 个粘性末端连接反应单位(CEU),相当于在16℃条件下,30min 内连接50% HindIII 消化后的lambda DNA片段。
用途 |
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快速DNA连接 |