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金属螯合亲和层析,又称固定化金属离子亲和层析(Immobilized metal ion affinity chromatography, IMAC)。该法利用蛋白质表面的某些氨基酸(如组氨酸、色氨酸、半胱氨酸等)和金属离子(Cu2+、Zn2+、Ni2+等过渡金属离子)发生特殊的相互作用的原理,从而实现蛋白质的分离。
琼脂糖金属螯合介质(Ni-TED)是将三(羧甲基)乙二胺(TED)键合在高流速琼脂糖微球上,并螯合金属离子Ni2+而形成的一种亲和层析介质。影响蛋白质/多肽与金属离子鳌合力大小的因素主要是蛋白质表面可结合的氨基酸(种类、数目和分布)、金属离子的种类和密度、层析条件(pH、盐的种类和浓度、添加剂等)。Ni-TED具有吸附容量大、选择性好、分辨率高、易于再生等优点,广泛用于生物制药和生物工程下游蛋白质、核酸及多肽的分离纯化,尤其是组氨酸标记蛋白质的分离纯化。
琼脂糖金属螯合介质(Ni-TED)是将三(羧甲基)乙二胺(TED)键合在高流速琼脂糖微球上,并螯合金属离子Ni2+而形成的一种亲和层析介质。影响蛋白质/多肽与金属离子鳌合力大小的因素主要是蛋白质表面可结合的氨基酸(种类、数目和分布)、金属离子的种类和密度、层析条件(pH、盐的种类和浓度、添加剂等)。Ni-TED具有吸附容量大、选择性好、分辨率高、易于再生等优点,广泛用于生物制药和生物工程下游蛋白质、核酸及多肽的分离纯化,尤其是组氨酸标记蛋白质的分离纯化。
参数 |
指标 |
基质 |
交联琼脂糖凝胶 |
配基 |
-N(CH2COOH)CH2CH2N(CH2COOH)(TED) |
形状 |
球形 |
平均粒径 |
90 μm |
金属离子密度 |
≥60 μmol Ni2+/ml wet gel |
EDTA耐受性 |
10mM EDTA,>4h |
最高流速* |
≥1500 cm/h |
最高耐压(净压)* |
≥0.18MPa (1.8 bar) |
储存条件 |
20%乙醇,4-30℃ |
*:层析柱20 cm × 1.0 cm I.D,介质高度10cm,常温,溶液为H₂O的条件下测,耐压为扣除系统压力后的净压力。