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生物试剂
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试剂盒内含
原理
该产品是一种试剂盒，可通过细胞培养板轻松检测SA-β-gal（细胞衰老相关的β-半乳糖苷酶）活性，SA-β-gal是衰老细胞的指标。 SPiDER-βGal是一种β-半乳糖苷酶检测试剂，只需将试剂添加到96孔板中，即可用于SA-β-gal活性的定量和多个样品的评估。
根据细胞数的SA-β-gal活性可以通过计算该细胞数，测量核酸（相关产物）的量或蛋白质的量来校正。并通过该试剂盒获得的测量值来评估衰老程度。
操作步骤
预先准备的细胞在该试剂盒随附的缓冲液中裂解。只需将荧光底物SPiDER-βGal加到细胞裂解液中，即可根据SA-β-gal活性检测荧光强度。
即使在10 cm培养皿或其它容器中制备细胞，也可以通过在细胞裂解后将细胞裂解液转移到96孔板上来检测荧光强度。
实验例
与荧光成像结果的相关性：
用平板分析法和细胞衰老检测试剂盒-SPiDER-βGal对不同传代水平的WI-38细胞进行荧光成像实验结果。
注意事项
用微孔板分析细胞时，会由于孔中细胞的数量不同导致结果可能不同。在此情况下，有必要通过对细胞进行计数并检查蛋白质总量来校正（标准化）获得的测量值。使用细胞计数标准化试剂盒，只需将试剂加到细胞培养基中，即可通过对细胞核染色获得的荧光强度轻松检测细胞数量。
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常见问题Q&A
| Q1：1个试剂盒可检测多少样品？ |
| A1： |
| 20 tests | 100 tests | |
| 检测数量 | 96孔板20个孔 | 1块96孔板 |
| 当n=3时 | 6个样品 | 30个样品 |
| Q2：是否可以先诱导衰老然后在96孔板上进行检测？ |
| A2：建议先用培养皿诱导细胞衰老，然后将细胞转移到96孔板中进行检测。 将未诱导衰老的细胞（对照）和诱导衰老的细胞（样品）放在同一块板上进行比较，如果在96孔板上诱导衰老时（取决于衰老诱导的天数），会发生细胞过度生长并导致细胞融合的情况。 另外即使预先接种少量细胞以避免融合，已经进行了衰老诱导处理的衰老细胞也可能不具有平板测定所需的灵敏度（细胞数）。 |
| Q3：在96孔板上应接种多少细胞？ |
| A3：最佳细胞数取决于细胞类型。 我们曾经在每个孔中接种1╳104个WI-38细胞进行实验。 更多详细操作，请参照说明书中的“实验例”。 |
相关文献
1、Y. Takenaka, I. Inoue, T. Nakano, M. Ikeda and Y. Kakinuma, "Prolonged disturbance of proteostasis induces cellular senescence via temporal mitochondrial dysfunction and subsequent mitochondrial accumulation in human fibroblasts", 2021, doi:10.1111/febs.16249.
2、H. Yamamoto-Imoto, S. Minami, T. Shioda, Y. Yamashita, S. Sakai, S. Maeda, T. Yamamoto, S. Oki, M. Takashima, T. Yamamuro, K. Yanagawa, R. Edahiro, M. Iwatani, M. So, A. Tokumura, T. Abe, R. Imamura, N. Nonomura, Y. Okada, D. E. Ayer, H. Ogawa, E. Hara, Y. Takabatake, Y. Isaka, S. Nakamura and T. Yoshimori, "Age-associated decline of MondoA drives cellular senescence through impaired autophagy and mitochondrial homeostasis", Cell Rep., 2022, doi:10.1016/j.celrep.2022.110444.
特点：
● 可用于SA-β-gal活性的定量和多个样品的评估
● 使用酶标仪检测