1. 在1.5ml无酶离心管中依次加入200μl待提取样品，200μl含Carrier RNA的Buffer BB(每2.5mlBuffer BB中加入50μlCarrier RNA溶液，现配现用)，20μl蛋白酶K溶液后立即混匀，置于72℃水浴中孵育10分钟。 如果样品量小于200 µl，请添加适当体积的0.9％氯化钠（或PBS）溶液，使样品的总量达到200µl。 2. 将步骤1所得溶液加入100μlBuffer BB并混匀。 3. 把吸附柱套在2ml收集管中。将上个步骤所得溶液加入柱中，8000×g离心1分钟。离心完后倒掉收集管中的废液。 4. 向吸附柱中加入500μl BufferIRB，8000×g离心1min，离心完后倒掉收集管中的废液。 5. 向吸附柱中加入500ul Buffer WB（已加入无水乙醇），8000×g离心1分钟，离心完后倒掉收集管中的废液。 6. 重复步骤5。 7. 倒掉收集管中的废液后将吸附柱再次套入收集管中，13000×g离心2分钟以除尽Buffer WB。将吸附柱套入新的1.5ml无酶离心管管中并置于室温放置5-10min彻底晾干乙醇。 注意：BufferWB中的乙醇残留会影响后续的酶反应实验。 8. 向吸附柱膜中间位置悬空滴加50μl Buffer EB（或无酶水），室温静置2min后，12000×g离心2min收集核酸溶液。丢弃柱子，盖上EP管盖子置于-20℃保存。 注意：洗脱体积不应小于30μl，体积过少影响回收效率。洗脱液的pH值对于洗脱效率有很大影响。为了提高核酸的回收量，可将离心得到的溶液重新加回离心吸附柱中，室温放置2min，13000g离心2min，将核酸溶液收集到离心管中。