操作步骤： 1. 根据情况使用进行以下步骤研磨最多100 mg的植物材料 1a.立即将组织置于液氮中用研钵和研杵彻底研磨。将组织粉末倒入用液氮提前冷却的无酶2 ml离心管中。让液氮蒸发，但不要使组织解冻。立即继续执行步骤2。 1b.组织匀浆处理：根据相应研磨设备步骤进行，研磨完成后立即执行步骤2。 2. 加入450 µl Buffer RLT（使用前请检查Buffer RLT是否加入β-巯基乙醇或DTT）最多100 mg组织粉末中，大力充分涡旋。 3. 将离心管放入高速离心机中以最大转速(~13,400×g)离心3分钟。 4. 收集上清并加入新的无酶1.5ml离心管中，同时加入0.5倍体积的无水乙醇混匀。不要离心，混匀后再执行步骤5。 加入乙醇后可能会形成沉淀为正常现象，这不会影响后续的操作步骤。如裂解液吸出400μl则加入200μl无水乙醇混匀。 5. 将步骤4混匀后的溶液转移入RNase-free吸附柱中并套上2ml收集管，≥8000x g（≥10,000rpm）离心1min，弃废液，直至将溶液全部转移完成吸附。 吸附柱最大上柱量为700μl，若溶液过多可分多次上柱。后续操作若无特殊说明吸附柱均置于2ml收集管中。 6. （可选步骤）向吸附柱中央加入80μl DNase Ⅰ工作液，室温（15℃-25℃）静置15min。配制DNase Ⅰ工作液：取10μl DNase Ⅰ储备液入新的RNase-free离心管中，并加入70μl Buffer RDD，轻柔混匀。 注意：DNase Ⅰ对物理变性特别敏感，所以混匀时请上下倒置轻柔混匀，切勿涡旋。请确认DNase Ⅰ工作液加入到正中央的柱膜上，否则DNase消化效果会不理想。 7. 向吸附柱中加入700μl Buffer RW1，≥8000×g(≥10,000 rpm)离心30s，弃废液。 8. 将吸附柱重收套回收集管中，向吸附柱中加入500μl Buffer RPE（使用前请确认Buffer RPE按要求加入4倍体积无水乙醇），≥8000×g(≥10,000 rpm)离心30s，弃废液。 9. 重复步骤8一次。 10. 倒弃滤液，将吸附柱放入收集管中,以最大转速(~13,400×g)离心3分钟干燥柱子。 11. 将吸附柱套入新的无酶1.5ml离心管管中，并置于无酶环境中开盖静置5-10min至乙醇晾干。 若吸附柱中残留乙醇将会对纯化后的RNA的下游实验造成影响。 12. 向吸附柱膜正中央加入50-100μl RNase-free Water，盖上盖子室温静置2-3 min。后置于离心机中最大转速(~13,400×g)离心3min得到RNA溶液。 RNA洗脱体积不应少于30μl，否则影响洗脱效率。洗脱后的RNA溶液应立即进行下游实验或置于-80℃储存。