操作步骤： 1. 取180-220mg的粪便放入2ml离心管中（未提供）中，并将该管放置在冰上等待使用。后续所有操作应在室温下进行。 当样品少于180mg也可正常进行。在使用少量的粪便时，不需要减少缓冲液的量。如果样品为液体，则将样品量改为200μl（用剪去尖部的枪头能更好的吸取）；如果样品为冷冻的粪便，则用手术刀切取180-220mg，注意在使用冷冻粪便时应避免样品在步骤2加入Inhibit EX Buffer前解冻，这会使DNA降解。 2. 在每个粪便样品中添加1ml InhibitEX Buffer，涡旋1min或直到样品完全混匀。 彻底涡旋样品很重要，这有助于确保最终洗脱液中的获得最多DNA。 3. 在70℃下水浴加热5min，期间可适当涡旋2-3次，每次涡旋约15s。 对于难以裂解的细胞如革兰氏阳性菌，可适当提高温度至95℃。本步骤主要用于粪便中病原微生物提取，若提取的目的主要是为了粪便物种自身的基因组则须忽略此步骤。 4. 最大转速 (~13,400×g)离心3min以沉淀颗粒物，吸取200μl上清液转移至新的2ml离心管中。 转移上清液时应避免吸到任何固体颗粒，如果上清中仍有可见颗粒，应再次离心样品。 5. 在装有200μl上清液的离心管中加入15µl Proteinase K溶液。再加入200μl Buffer AL并涡旋15s使溶液混匀。 注意：Proteinase K溶液不能与BufferAL先混合，需先后混匀加入。Buffer AL与样品需完全混匀。 6. 70℃下水浴加热10min。 7. （可选步骤）若需去除RNA，加入10µl RNaseASolution（20mg/ml)至溶液中，混匀后室温静置10min。 8. 向离心管中加入200μl的无水乙醇，涡旋混匀。 9. 将上述混匀的溶液转移至吸附柱上，盖上盖子，最大转速 (~13,400×g)离心1min。 如果溶液未完全通过吸附柱，则再次离心直至全部溶液通过吸附柱。 10. 倒弃流出液，把柱子重新装回收集管中。加入500μl BufferAW1（请先检查是否已加入无水乙醇）至柱子上并以12,000rpm离心1分钟。 11. 倒弃流出液，把柱子重新装回收集管中。加入500μl BufferAW2（请先检查是否已加入无水乙醇）至柱子中，12,000rpm离心1分钟。 12. 重复操作步骤11一次。 13. 倒弃流出液，把柱子重新装回收集管中。最大转速 (~13,400×g)离心空柱2分钟，以甩干柱子的残留物质。(这一步要尽量提高离心速度以减少乙醇的残留)。 注意：乙醇的残留会影响后续的酶反应（酶切、PCR等）实验，彻底晾干吸附材料中残余的漂洗液。 14. 将柱子转移至新的1.5ml无菌的离心管，敞开盖子室温静置10min以彻底晾干漂洗液。 15. 加入30~100µl预热至70ºC的Buffer ATE至柱子的膜中央，静置2分钟后以最大转速 (~13,400×g)离心2分钟收集离心下的基因组DNA。 16. 弃去柱子，将基因组DNA溶液于-20℃保存（短期可保存2-8℃）或进行下游实验。