商家描述
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操作步骤:
1. 用无酶水将样品调整到100µl的体积,后往其中加入350μl Buffer RLT并混匀。
2. 往混匀的样品中加入250µl无水乙醇(96–100%),并通过反复吹打混匀。不要离心,并立即进行下一步操作。
3. 将步骤2混匀后的溶液转移入RNase-free吸附柱中并套上2ml收集管,≥8000×g (≥10,000 rpm)离心30s,弃废液。
吸附柱最大上柱量为700μl,若溶液过多可分多次上柱。后续操作若无特殊说明吸附柱均置于2ml收集管中。
4. 向吸附柱中加入500μl Buffer RPE(使用前请确认Buffer RPE是否按要求加入4倍体积无水乙醇),≥8000×g(≥10,000 rpm)离心30s,弃废液。
5. 重复步骤6一次。
6. 倒弃滤液,将吸附柱放入收集管中,以最大转速(~13,400×g)离心3min干燥柱膜。
7. 将吸附柱套入新的无酶1.5ml离心管中,并置于无酶的环境中开盖静置5-10min至乙醇晾干。
若吸附柱中残留乙醇将会对纯化后的RNA的下游实验造成影响。
8. 向吸附柱膜正中央加入30-500μl RNase-free Water,盖上盖子室温静置2-3 min。后置于离心机中以最大转速(~13,400×g)离心3min得到RNA溶液。
RNA洗脱体积不应少于30μl,否则影响洗脱效率。洗脱后的RNA溶液应置于-80℃储存。