操作步骤： 1. 将5倍体积的Buffer PB添加到1倍体积的PCR样品中，然后混匀。 例如，将500µl Buffer PB添加到100µl PCR样品（不包括油的体积），无需去除石蜡油或矿物油。 2. 溶液完全溶解后，检查颜色是否为黄色。 如果混合物的颜色为红色，则加入10µl 3 M醋酸钠(pH 5.0)并混合，混合物的颜色会变成黄色。DNA吸附到膜上仅在pH ≤ 7.5时有效。Buffer PB含有一种pH指示剂，在pH ≤7.5时为黄色，在较高pH时为红色，可通过颜色轻松确定DNA结合的最佳pH。 3. 将吸附柱套在2ml收集管中，并将上一步得到的溶液加入到吸附柱中，≥8000×g (≥10,000 rpm)离心30s，倒掉收集管中的废液，将吸附柱放回收集管中。 吸附柱最大容量为700µl，若样品体积大于700µl，可分批加入。 4. 向吸附柱中加入500µl Buffer PW（已加入无水乙醇），≥8000×g (≥10,000 rpm)离心30s，倒掉收集管中的废液，将吸附柱放回收集管中。 注意：如果回收的DNA是用于盐敏感的实验，例如平末端连接实验或直接测序，建议加入Buffer PW后静置2-5min后再离心。 5. 重复操作步骤4一次。 6. 倒掉收集管中的废液后将吸附柱再次套入收集管中，最大转速 (~13,400×g)离心2min以干燥吸附柱膜，目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除。将吸附柱套入新的1.5ml离心管中并于室温开盖放置5-10min彻底晾干。 注意：Buffer PW中的乙醇残留会影响后续的酶反应（酶切、PCR等）实验。 7. 向吸附柱膜中央位置悬空滴加30-50µl Buffer EB，盖上盖子室温静置2min后，最大转速(~13,400×g)离心2min收集DNA溶液并置于-20℃保存。 注意：洗脱体积不应小于30μl，体积过少影响回收效率。洗脱液的pH值对于洗脱效率有很大影响。若后续做测序，需使用ddH2O做洗脱液，并保证其pH值在7.0-8.5范围内，pH值低于7.0会降低洗脱效率。为了提高DNA的回收量，可重复操作步骤7一次。