BL21(DE3) CodonPlus-RIPL Chemically Competent Cell

l 产品规格

货号：KTSM112L

规格：100 μL/支

pUC19(control vector，100 pg/μL）：5μL

保存条件：-80℃   

有效期：6个月

运输：干冰运输

l 基因型

F^-ompT hsdS(r_B^-m_B^-) dcm⁺ Tet^R gal λ(DE3) endA Hte [argU proL Cam^R] [argU ileY leuW Strep/Spec^R]

l 产品说明

BL21(DE3) CodonPlus-RIPL菌株含有pACYC 质粒，补充大肠杆菌缺乏的4种稀有密码子(AGA,AUA, CCC, CUA)对应的tRNA (argU, ileY, proL, leuW)，提高外源基因，尤其是富含 AT-或 GC-的真核基因在原核系统中的表达水平。该菌株染色体整合了λ噬菌体 DE3 区(DE3 区含有T7 噬菌体 RNA 聚合酶)，可同时表达T7 RNA聚合酶和大肠杆菌RNA聚合酶,可用于pET 系列、pGEX、pMAL 等质粒的蛋白表达，同时具有四环素，氯霉素，链霉素，壮观霉素抗性。BL21(DE3) CodonPlus-RIPL感受态细胞由特殊工艺制作，pUC19质粒检测转化效率>10⁸cfu/μg DNA。

l 操作方法

1. 从-80℃冰箱取出感受态细胞，冰浴5 min, 融化后吸取100 uL，加入目的质粒（连接产物）, 轻轻混匀，冰浴25分钟。

2. 42℃ 水浴热激45秒，迅速放回冰中并静置2分钟，该过程不要摇动。

3. 向离心管中加入700 μL 2YT 或LB无菌培养基（不含抗生素），37℃、200 rpm/min、60分钟培养复苏。

4. 5000 rpm离心一分钟收菌，留取 100 μl 左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含 34 µg/ml 氯霉素及所选质粒筛选抗生素的 2YT 或 LB 培养基上。将平板倒置放于 37℃培养箱过夜培养。