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M5 T4 DNA ligase
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  • 货号 MF016-01
  • 品牌 Mei5bio/聚合美 ( 生产厂家 )
  • CAS号 见包装
  • 规格/包装 20000u
  • 单位 Ul
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商家描述 商家资质信息 产品评价(0)
【储存条件】
长期保存,请置于-20˚C,有效期24个月。经常使用,也请置于-20˚C保存,聚合美建议客户将M5 T4 DNA Ligase Buffer分装保存,以保证缓冲液中的活性物质稳定。

【产品简介】
M5 T4 DNA ligase是将源于T4噬菌体的T4 DNA连接酶基因在大肠杆菌中高效表达,经过多次柱层析纯化而获得的高效率、高纯度、高活性的DNA连接酶。该酶具有催化双链 DNA 或 RNA 上相邻的 5´-磷酸末端和 3´-羟基末端形成磷酸二酯键的特性。不仅能够催化平齐末端或粘性末端之间的连接,还可以修复双链 DNA、RNA 或 DNA/RNA 杂交双链中的单链切刻。M5 T4 DNA 连接酶经过严格的质控检测,确保该产品具有最高的活性和纯度。

【单位定义】
(以粘性末端活性单位)1单位是指在20μl 1× M5 T4 DNA ligase 反应缓冲液中,16˚C反应条件下,30分钟能使50%经HindIII消化的λ DNA片段[5’端浓度为0.12 μM (300 μg/ml)]连接所需要的酶量。

【产品组分】
M5 T4 DNA Ligase 50 μl 10× M5 T4 DNA Ligase Buffer 250 μl

【反应条件】
1X M5 T4 DNA Ligase反应缓冲液:50mM Tris-HCl (pH7.5 @25˚C), 10mM MgCl2, 10mM DTT, 1mM ATP。推荐DNA 5’末端浓度为0.1-1.0μM, 16˚C温育。 热失活:65˚C 10分钟。

【注意事项】
ATP是反应必须的辅因子。而大肠杆菌DNA连接酶则需要NAD作为辅因子。如T4 DNA连接酶稀释后于-20˚C贮存,应选用含50%甘油的贮存缓冲液;如稀释后立即使用,则用1× T4 DNA连接酶缓冲液稀释即可。

【浓度】
200,000 units/ml

【适用范围】
• 高效连接粘性末端和平末端: TA 克隆 和 Blunt 克隆;
• 修复dsDNA 切刻,同时可以用于连接RNA 和 DNA;
• 构建高丰度克隆文库

详见说明书>>>/item/desc/6461/20160901/1472693376398_MF016- M5 T4 DNA Ligase-V1.pdf
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