产品介绍

ESF 921™昆虫细胞培养基是一种完全无血清，无蛋白质的培养基。用于多种昆虫细胞(包括Sf9、Sf21、Tni (High Five™)和果蝇S2)的细胞生长、蛋白质和杆状病毒载体产生。

ESF 921含有L -谷氨酰胺和Kolliphor®P188 (Pluronic F68)。

Expression Systems的昆虫细胞培养基被广泛认为是BEVS应用的行业标准。

产品信息

ESF921是一个1倍完整的不用稀释、即用的培养基。无需添加谷氨疏胺或表面活性剂，如泊洛沙姆188;不推荐使用抗生素，然而，必要时，可以使用青霉素-链备素( 双抗)或庆大霉素(三抗 )。

安全信息

请阅读安全数据表(SDS)，并遵循操作说明: 佩戴适当的防护眼镜、衣服和手套。

培养条件

培养基:  ESF 921

细胞系(s):  Sf9、Sf21、Tni、S2

培养类型: 悬浮培养和贴壁培养

推荐培养容器: 摇瓶或转瓶

温度范围: 27°C至28°C

培养箱: 干燥，无二氧化碳环境。确保适当的气体交换，尽量减少培养物暴露在光线下。

单层细胞培养

1.使用倒置显微镜观赛单层细胞，以确保融合: 使用无菌移液管或通过抽吸法去除培养基和任何漂浮的细胞。2.向烧瓶中加入4ml(每25平方厘米)ESF 921通过反复将培养基移过单层来重悬细胞;可能有必要通过轻烧瓶的侧面来帮助细胞脱离表面张力。

3.测定细胞悬液的活细胞密度。

4.接种0.5-1 x10细胞(每25平方厘米)到室温ESF 921(每25平方厘米5 mL)的新培养瓶中5.在干燥、无二氧化碳培养箱中以27°C培养，松开瓶盖或使用带有换气口的烧瓶(推荐)。

细胞对于ESF 921培养基的使用驯化

细胞适应ESF 921培养基时，建议使用梯度适应。在开始适应过程之前，细胞存活率至少要达到95%S9)、93%(Tni)、90%(Sf21)或85%(S2)，并且生长速度处于细胞分裂对数生长期。

1. 将细胞传代至esf921与原始培养基的比例为50:50。在适应过程中，按照1  10个细胞/mL的原始播种密度接种。

2. 在干燥、无二氧化碳培养箱中以27°C培养，在轨道摇床平台上以120-140 rpm旋转摇瓶培养物。松开盖子，允许气体交换。

3. 当活细胞数量为4-6 x 105个/ mL时传代(分裂后3-4天)，按照75:25的比例放入ESF 921原始培养基中。

4.重复上一步，增加ESF 921与原始培养基的比例(75: 25，然后是88: 12,95: 5)，直到使用100% ESF 921。可能需要在-种比例的情况下传代多次。

5.昆虫细胞在适应过程中可能会膨胀。膨胀2-3微米是正常现象，5微米以上是细胞应激培养的提醒，应该用一批新的细胞重新开始适应。

在100% ESF 921中传代几次后，活细胞计数应符合上表，存活率>90%。