【预期用途】

本试剂盒可用于定性检测人血清或血浆（柠檬酸盐、肝素）中抗巨细胞病毒（CMV）的IgG类抗体。

【检测原理】

特异性抗体的定性免疫酶学测定是基于ELISA（酶联免疫吸附试验）技术。微孔板上包被特定的抗原，以结合样品的相应抗体。洗涤微孔以去除所有未结合的样品材料后，添加酶联物（HRP），与捕获的抗体结合。在第二个洗涤步骤中，未结合的共轭物被去除。通过加入四甲基联苯胺(TMB)底物，得到蓝色反应产物，可以观察到结合结合物形成的免疫复合物。该产品的强度与样品中特异性抗体的数量成正比。加入终止液以终止反应，蓝色变成了黄色。使用酶标仪器读取450/620nm处的吸光度。

【储存条件】

试剂盒必须储存于2-8℃的环境中，打开的试剂在标签上规定的有效期内是稳定的。

【检测步骤】

1）加100µL标准品或质控品和稀释的样品至相应的微孔中，保留A1为空白对照。

2）用提供的封板纸封板。

3）37± 1 °C孵育1小时± 5 分钟。

4）弃掉微孔中的内容物，用稀释的洗涤液冲洗孔3次(每次每孔300µL)。洗涤和吸入的时间间隔应>5s。在吸水纸上用力击打微孔板，以去除残留的液滴。

5）加100µL酶联物至每个微孔中，除了空白孔。

6）室温下（20-25℃）避光孵育30分钟。

7）重复步骤4。

8）加100µL底物液至每个微孔中。

9）在黑暗环境中室温下孵育15分钟。

10）加100µL终止液至每个微孔中。

11）在加入终止液后的30分钟内，用酶标仪读取在450/620nm处的吸光度

临界值是双孔临界质控吸光度的平均值。

例如，临界质控吸光度0.44+临界质控吸光度0.42=0.86/2=0.43

临界值=0.43

【试剂盒组成】

1）微孔板              12x8，包被巨细胞病毒抗原

2）样品稀释液        1×100ml，磷酸盐缓冲液（10mM），pH 7.2 ± 0.2，即用型

3）终止液              1×15ml，硫酸，0.2mol/L，即用型

4）洗涤浓缩液        20倍浓缩，磷酸盐缓冲液（0.2M），1×50ml，pH 7.2 ± 0.2

5）酶联物              1×20ml，过氧化物酶标记的人IgG抗体，即用型

6）底物液              1×15ml，3,3’,5,5’-四甲基联苯胺（TMB），即用型

7）阳性质控           1×2ml，即用型

8）临界质控           1×3ml，即用型

9）阴性质控           1×2ml，即用型

10）封板纸             1x

11）使用说明书      1x