
商家描述
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产品名称:DHR123(活性氧荧光探针)
货 号:CD4667
C A S:109244-58-8
规 格:10mg
分子式:C21H18N2O3
分子量:346.38
性质:
1. 外观:粉红色粉末
2. 纯度:≥95%(HPLC)
产品描述:二氢罗丹明123(DHR123)是一种不带电荷且无荧光的活性氧(ROS)指示剂,可以跨膜扩散,进入细胞后如果有氧自由基,它在线粒体中被氧化成罗丹明123阳离子,呈现绿色荧光(Ex/Em=507/529 nm)。DHR123常用来检测内皮细胞、嗜酸性细胞和反应性小胶质细胞产生的活性氧中间物。
3.染色程序:
(1)将0.4mg DHR123溶解到1mL DMSO中制备成1mM DHR123-DMSO溶液。用培养基稀释1mM DHRh123溶液以制备100µM DHRh123缓冲液。
(2)准备两批HL60细胞,细胞密度~6×106个/mL缓冲溶液为Krebs-Ringer buffer.
(3)将DHR123缓冲液加入两批HL60细胞中,DHR123终浓度为10uM,并在37℃下孵育30分钟。
(4)其中一批HL60细胞与DHR123培养后,加入氧自由基诱导剂phorbol 12-myristate 13-acetat (PMA)终浓度50uM。
(5)另一批HL60细胞加入SNARF-1 AM acetate (SNARF-AM)探针终浓度5uM在37°C培养10min,离心用并用培养液洗涤细胞。
(6)用带有荧光素滤光片的荧光显微镜观察细胞。
储存条件:-20℃干燥避光保存,有效期三年。
注意事项:
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套
参考文献: Lydia M. Henderson et al. Dihydrorhodamine 123: a fluorescent probe for superoxide generation. Eur.J.Biochem. 217, 973-980.