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AngYuBio 发根农杆菌是根瘤菌科(Rhizobiaceae)农杆菌属 (agrobacterium)的一种革兰氏阴性土壤细菌,它能够感染大多 数双子叶植物和少数单子叶植物以及个别裸子植物。Ar.1193发 根农杆菌含有pRi1193农杆碱型Ri质粒,特别适合豆科,茄科植 物毛状根的诱导,同时具有羧苄青霉素,链霉素,利福平抗性。 AngYuBio Ar.1193化学转化感受态细胞经特殊工艺制作, pCAMBIA2301质粒(卡那霉素抗性)检测,转化效>104 cfu/μg DNA。
操 作 说 明
1.取-80℃保存的Ar.1193发根农杆菌感受态于室温或手心片刻 待其部分融化,处于冰水混合状态时插入冰中。
2. 每100μl感受态加入0.01-1 μg质粒DNA(转化效率较高, 第一次使用前最好做预实验确定所加质粒的量),用手快速、 剧烈拨打管底混匀或用枪吹吸混匀,依次放于冰中静置5分钟、 液氮5分钟、37℃水浴5分钟、冰浴5分钟。
3. 冰浴中拿出放室温,加入700μl 无抗生素的TY液体培养基, 于28℃振荡培养2小时。
4. 6000 rpm 离心一分钟收菌,留取 100 μl 左右上清轻轻吹 打重悬菌块涂布于含相应抗生素的 TY平板上,倒置放于28℃培 养箱培养2-3 天