
链霉亲和素(AB001)产品说明
链霉亲和素(streptavidin)是源自于阿维丁链霉菌(streptomyces avidinii)的蛋白,由四个相同的亚基组成,每个亚基可结合一个生物素分子。链霉亲和素与生物素具有极强的亲和力,其解离常数约为10-14M这一特质使得链霉亲和素-生物素系统广泛应用于荧光显微镜术、免疫电镜、流式细胞分析、Western杂交、ELISA检测等传统生物学技术,以及生物芯片和纳米生物学等现代前沿研究领域。与来源于鸡蛋清的亲和素相比,链霉亲和素不含糖基修饰,等电点接近生理PH值,因而非特异性吸附显著低于前者,可提供更高的检测信噪比。
本公司生产的链霉亲和素(编号:AB001)不含天然链霉亲和素N-末端及C-末端多肽片段,避免了其对生物素结合的空间位阻。此外,AB001系列链霉亲和素在每个亚基的C-末端引入了组氨酸标签(His6),用户可方便的设计基于Ni-NTA的实验方案。
本产品为高度纯化制品,SDS-PAGE检测纯度≧99%。此外,本产品具有很高的活性,1mg蛋白可结合≧16ug生物素,接近其理论活性(16.9Units/mg,1unit定义为结合1ug生物素所需的链霉亲和素的量(单位mg)。
编号:AB001-1,ABOO1-10,AB001-100
规格:1毫克,10毫克,100毫克
性状:冻干粉,含微量磷酸盐
产品来源:重组蛋白,大肠杆菌表达
分子量:57.8KD
消光系数:1mg/ml浓度时,280nm光吸收A280=3.2(1)
纯度: ≧99 %(SDS-PAGE检测)
活性: ≧16Units/mg(生物素滴定法测定(2))
保存条件:-20℃干燥保存,活性至少保持两年。
溶解方法:以纯水溶解冻干粉至5-10mg/ml浓度,分装成适宜体积,-20℃或-80℃冻存。避免反复冻溶,其活性至少可保持半年。如欲在4℃保存溶液,可添加适量杀菌剂(如0.05%叠氮钠)以避免微生物生长,并尽快用完。链霉亲和素在高浓度时,冻干过程中或反复冻溶条件下易形成不溶的聚集体,如见溶液略呈浑浊,可经16000g离心5分钟去除不溶物。不溶物含量很少,不影响产品有效成分的含量及使用。
定量方法:链霉亲和素是一种高度稳定的蛋白质,可抵抗蛋白酶消化。极端PH和温度。以及较高浓度的变性剂和去污剂。相应的,常用的蛋白质浓度测定方法,如Lowry法、Bradford法和Biuret法等,其染料难以有效结合到链霉亲和素分子上,故而测得浓度偏低。推荐采用280nm光吸收值测定其浓度。
参考文献:
1. Suteri M.et al.,Isolation and Characterization of Highly Purified Streptavidin Obtained in a Twostep Purification Procedure from Strepomyces avidinii Grown in a Synthetic Medium. J.Immunol. Meth.1988,113:83-91
2. Green N.M.Spectroscopic Evidence for the Participation of Tryptophan Residues in the Binging of Biotin by Avidin.Biochim.Biophys.Acta,1962,59:244-246