
细胞周期与细胞凋亡检测试剂盒
产品说明:
细胞周期与细胞凋亡检测试剂盒(Cell Cycle and Apoptosis Analysis Kit)是一种采用经典的碘化丙啶染色(Propidium Iodide staining)方法进行细胞周期与细胞凋亡分析。
碘化丙啶(Propidium Iodide,简称PI)是一种双链DNA的荧光染料。碘化丙啶和双链DNA结合后可以产生荧光,并且荧光强度和双链DNA的含量成正比。细胞内的DNA被碘化丙啶染色后,可以用流式细胞仪对细胞进行DNA含量测定,然后根据DNA含量的分布情况,可以进行细胞周期和细胞凋亡分析。
碘化丙啶染色后,假设G0/G1期细胞的荧光强度为1,那么含有双份基因组DNA的G2/M期细胞的荧光强度的理论值为2,正在进行DNA复制的S期细胞的荧光强度为1-2之间。凋亡细胞由于细胞核发生浓缩以及发生DNA片段化(DNA fragmentation)导致部分基因组DNA片段在染色过程中丢失,因此凋亡细胞碘化丙啶染色后呈现明显的弱染,即荧光强度小于1,在流式检测的荧光图上出现所谓的sub-G1峰,即凋亡细胞峰。
细胞发生凋亡时,由于胞浆和染色质浓缩、核碎裂,产生凋亡小体,使细胞的光散射性质发生变化。在细胞凋亡的早期,细胞对前向角光散射的能力显著降低,对侧向光散射的能力增加或没有变化。在细胞凋亡的晚期,前向和侧向光散射的信号均降低。因此可通过流式细胞仪测定细胞光散射的变化观察细胞凋亡情况。
本试剂盒通常应用于培养的贴壁或悬浮细胞的细胞周期与细胞凋亡检测。如果用于组织的细胞周期与细胞凋亡检测,则必须把组织消化成单细胞状态,才可以进行检测。
本试剂盒足够检测50个样品,每个样品的细胞数量可以为10-100万。
试剂盒组份:
产品编号 |
产品名称 |
规格 |
价格 |
C1052 |
细胞周期与细胞凋亡检测试剂盒 |
50次 |
300元 |
产品组分编号 |
产品组份名称 |
包装 |
保存 |
C1052-1 |
染色缓冲液 |
25ml |
-20°C避光2年 |
C1052-2 |
碘化丙啶染色液(20X) |
1.25ml |
-20°C避光2年 |
C1052-3 |
RNase A(50X) |
0.5ml |
-20°C避光2年 |
注意事项:
1)本试剂盒需要使用流式细胞仪进行检测。需自备PBS和70%乙醇。
2)细胞处理需轻柔,尽量避免人为的损伤细胞。
3)为防止不同批次细胞在实验时所处周期不同导致重复性差,可以在实验前进行细胞的同步化处理。实验细胞应处于对数生长期,贴壁细胞一般在50~80%汇合度时收集为宜。
4)400目筛网过滤是用来将粘在一起的细胞团滤掉,留下单细胞,否则会出现人为的多倍体干扰。如果没有条件过滤,请在染色之前将细胞轻弹以分散,再进行染色。
5)荧光染料均存在淬灭问题,保存和使用过程中请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。
6)碘化丙啶对人体有刺激性,操作碘化丙啶时,应注意防护,保护眼睛、避免吸入。
7)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
特别提醒:
1) 本公司所有产品仅限于专业人员用于生命科学研究,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅!
2) 本公司所有产品必须由合格专业技术人员操作同时佩戴口罩/手套/实验服并遵守生物实验室安全操作规程!