商家描述
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此款试剂盒是本公司联合权威机构即北京疾控研发的一款新型冠状病毒全
基因组富集试剂盒。以武汉株新冠病毒为参考序列,结合现有的变异株,评估全
基因组范围内的基因高变区和基因保守区。在基因保守区内,设计多重引物,通
过 100 对左右引物覆盖病毒全基因组。各对引物直接设计重叠区域,便于基因组
组装。对设计完成的引物对,使用各基因型新冠病毒临床样本进行测试优化,改
进部分引物对设计,形成最终实验方案。
预期用途:用于特异性富集新型冠状病毒全基因组序列。实验结果仅作为基
础研究参考。
适用样本:适用于毒株、鼻拭子、咽拭子、痰液、肺泡灌洗液、便悬液等标
本核酸。
适用设备:普通 PCR 仪。试剂组成:针对 2019-nCoV 的特异性的 PCR 扩增引物,逆转录体系,高保
真扩增体系.
规格:30T/盒
贮藏及有效期:-20℃以下冷冻保存,避免反复冻融,有效期为 12 个月。
本款试剂盒在测序过程中使用的位置:
核酸提取→本试剂盒→建库→测序→数据分析
基本操作流程:
1 新型冠状病毒 RNA 提取:新型冠状病毒标本按照病毒RNA 提取试
剂盒的相应要求和步骤进行提取。提取的病毒RNA 需储存于-70℃备用,避
免反复冻融。
2 反应体系配制:取出试剂盒中的试剂,室温融化后震荡混匀, 离心数秒
后置于冰上。
2.1 反转录:取出新冠全基因组富集试剂①,按照说明书的方案配置反应
体系,总体积 20 μL。
充分混匀反应液并短暂离心,按照说明书程序进行反应。
2.2 特异性富集:取出新冠全基因组富集试剂②、③、④及引物A 和引
物B,按照说明书的方案配置两管反应体系,每管体积
50 μL。
充分混匀反应液并短暂离心,两管反应液均按照如下程序进行反应。
2.3 扩增反应结束后,将两管产物集中在一管中进行后续扩增产物纯化,并进
行高通量测序文库构建。