
腔肠素h(Coelenterazine h,CTZ-h)是天然腔肠素(Coelenterazine native,CTZ-native)的脱羟基衍生物。CTZ-h形成的水母发光蛋白复合物比CTZ-native形成的水母发光蛋白复合物的荧光强度高10倍以上(大发射波长~466nm,半衰期为0.6-1.2sec)。CTZ-h形成的水母发光蛋白复合物比天然发光复合物对钙离子灵敏度更高,是一种检测钙离子浓度微小变化的实用探针。另外,CTZ-h是海肾荧光素酶(Renilla luciferase,Rluc)的底物,适用于体内外报告基因分析。
本品为体内成像研究的注射用腔肠素h(Injectable h-Coelenterazine),不仅含有超纯的腔肠素h(>99%),还提供特别设计的Inject-Diluent溶剂,能够达程度的溶解腔肠素h,从而小化体内注射体积。另外,与传统乙醇溶解的腔肠素h相比,用Inject-Diluent溶解的腔肠素h能得到更好的荧光信号。
产品组分
编号 |
组分名称 |
产品货号(规格) |
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MX4609-1MG |
MX4609-10MG |
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MX4609-A |
Native Coelenterazine h |
2×500μg |
20×500μg |
MX4609-B |
Inject-Diluent |
1×500μl |
10×500μl |
注意事项
1) 本品特别开发适用于体内实验。若仅做体外实验,可使用我司提供的天然腔肠素(Coelenterazine Native)(# MX4606-1MG)或腔肠素h(Coelenterazine h)(# MX4608-1MG)。
2) 发光蛋白与荧光素酶是完全不同的,比如腔肠素h(CTZ-h)适合用作海肾荧光素酶(Rluc)的底物,但不适合用作分泌型膜锚定荧光素酶(Gluc)的底物。天然腔肠素(CTZ-native)是为一适合分泌型膜锚定荧光素酶的一种报告基因底物。
3) 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
操作步骤
1. 使用装有23 gauge或更小针头的0.5-1.0ml注射器,吸取150μl 温热(35-50℃)的Inject-Diluent。
2. 将150μl Inject-Diluent打入Native Coelenterazine瓶内,使用针头和注射器上下吸打或低速涡旋,直至看到完全透明溶液,此时得到腔肠素溶液浓度为3.33mg/ml。如果溶液没有完全透明,用水浴锅或加热板在60-80℃加热几分钟,检查完全透明。
3. 按下表1,用胰岛素注射器吸取15-75μl充分溶解的腔肠素h溶液(3.33mg/ml),通过尾静脉注射到动物体内。检查,排气,冲洗针头。使用胰岛素注射器的优势在于很低的液体滞留体积(<2μl)。缓慢注射。
建议按照表1 单只小鼠(25g体重)的腔肠素h溶液(3.33mg/ml)注射剂量表
需要的底物质量 |
腔肠素h溶液注射体积 |
50μg |
15μl |
100μg |
30μl |
200μg |
60μl |
250μg |
75μl |