货号： PH1710
规格： 50T | 100T
保存： 蛋白酶抑制剂-20℃保存；蛋白稳定剂-20℃保存；蛋白提取液室温保存。 有效期12个月

产品简介

革兰氏阳性菌总蛋白提取试剂盒可以从各种革兰氏阳性菌菌体中提取总蛋白，可用于纯化蛋白的粗品制备及总蛋白制备。提取过程简单方便。该试剂盒含有蛋白酶抑制剂混合物和磷酸酶抑制剂混合物，阻止了蛋白酶对蛋白的降解，为提取高质量的蛋白提供了保证。

该试剂盒提取的蛋白具有天然活性，可用于报告基因检测、SDS-PAGE 电泳检测、Western blotting、凝胶阻滞实验、免疫共沉淀、酶活分析等下游实验。每毫升菌液大概可以提得 5-10mg 蛋白。采用 BCA 或 Lowry 法进行蛋白定量。本试剂盒提取的蛋白不可用于 2D 电泳。

产品特点：

1、 使用方便：不需昂贵设备。

2、 可以处理各种细菌菌体，包括新鲜菌液和冰冻菌体。

3、 将蛋白提取的时间缩短至 30 分钟-1 小时。

4、 采用温和的中性裂解组分，保持蛋白活性。

5、 含蛋白稳定剂，提取的蛋白稳定。

6、 紫外检测蛋白浓度时，背景干扰低。

7、 蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包含6种独立的蛋白酶抑制剂；每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。该混合物优化的组成使其可以抑制几乎所有重要的蛋白酶活性，包括丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。

8、 本试剂盒中不有 EDTA，与金属螯和层析等兼容。

产品组分 50T 100T

注：

● 蛋白提取液： 含多种有效成分，可以充分释放蛋白，又可结合释出的蛋白防止沉淀。

● 蛋白酶抑制剂混合物：包含6种独立的蛋白酶抑制剂，AEBSF、Aprotinin、Leupeptin、Pepstatin

A、Bestatin、E-64。

注意：

1、 蛋白酶抑制剂混合物避免反复冻融。

2、 如果试剂盒不能短时间内用完，蛋白酶抑制剂混合物不可以一次全部加入提取液。

注意事项

● 本试剂盒仅供科学研究使用。

● 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖和管内壁上的液体离心至管底，避免开盖时试剂损失。

● 禁止与其他品牌的试剂混用，否则会影响使用效果。

● 最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。

● 避免皮肤或粘膜与试剂接触。

使用注意事项：

1. 旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。

2. 实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。

3. 蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀，不影响使用，溶解后正常使用。

4. 可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶抑制剂单品。

5. 本试剂盒中提取液和蛋白酶抑制剂中均不含 EDTA，根据需要可自行加入。

使用方法：

革兰氏阳性菌蛋白提取

1、 裂解液的准备：根据所需要提取的样本量，每500ul裂解液中加入2ul蛋白酶抑制剂Mix和5ul蛋白稳定液，充分混匀后置冰上备用。

2、 在4℃ 12000RPM条件下将菌液离心5min，弃上清，尽量吸干剩余液体，收集菌体，用PBS洗菌体2次。若为冷冻菌体直接进行下面操作步骤即可。

3、 按每20mg-50mg湿重菌体样本加入500ul裂解液，吹打混匀，冰上放置20-30分钟。

4、 300w，10s超声/10s间隔条件下冰浴超声至菌液变清。若无超声条件，可不超声，将上一步骤裂解液处理时间延长，中间每隔10分钟涡旋振荡混匀，至澄清。

5、 在4℃ 12000RPM条件下将菌液离心5分钟，将上清移入冷的干净离心管。

6、 即得革兰氏阳性菌蛋白样品。