KASP基因分型检测

技术原理：

以SNP分型检测为例，在PCR过程中，两个探针能与正向引物和反向引物之间的互补序列特异退火结合。当探针以完整形式存在时，由于能量共振转移，荧光基团只发出微弱荧光。特异的探针与相应的等位基因杂交后，DNA聚合酶发挥5’外切酶活性，把报告荧光基团切割下来，从而发出荧光；而SNP探针的错配形式不会引起切割，无荧光信号。MGB分子结合到DNA螺旋小沟，通过稳定MGB探针/模板提高杂交稳定性，使短至13个碱基的探针获得高错配区分辩别能力。MGB探针包括一个不发荧光的淬灭基团（NFQ），极大消除传统淬灭基团产生的背景荧光，提高信噪比，从而提高检验灵敏性。

KASP基因分型检测：

技术特点：
1. 适合位点少，样本通量高的检测，每个位点需要合成一对探针，探针合成费用高；
2. 应用实时荧光定量PCR仪进行定量检测；
3. 操作简便，只需一步 PCR 反应，无须纯化和预处理，直接上机检测；
4. 结果清晰，软件分析结果界面友好，标出每个样本的基因型及荧光强度，非常直观；

适用范围：

特别适合样本数量超过1500个以上，位点数量比较少的SNP分型。

客户需要提供：
1. 细胞，组织或血液等样品材料，基因组DNA提取费用单独收费；
2. 基因组DNA（体积≥30μl，浓度≥50 ng/μl），纯度 OD260/280 为1.7～1.9之间；
3. 人类基因组需提供SNP位点的RS号。其它物种如牛、鸡、鱼等无rs号的，需提供SNP位点上下游各200bp的确切序列，SNP位点的突变类型，以及位点的上下游25bp内是否存在其它连锁位点。

最终提交结果：
1. SNPs结果（ExceL表格）；
2. 完整实验报告：扩增和反应体系、所涉及的引物、探针序列；