mRNA qPCR检测
荧光定量PCR技术是通过荧光染料或荧光标记的特异性探针,对PCR产物进行标记跟踪,实时监控反应过程。随着PCR 反应的进行,反应产物不断累积,荧光信号强度也等比例增加。每经过一个循环,收集一次荧光强度信号,这样就可以通过荧光强度变化监测产物量的变化,结合相应的软件对产物进行分析,可以得到荧光扩增曲线,计算待测样品初始模版的量。实时荧光定量PCR技术是一次由定性技术向定量技术的飞跃,运用该项技术,可以对DNA、RNA样品进行相对定量、绝对定量和定性分析。君诺德生物基于多年的经验,可以提供mRNA 表达量水平检测、microRNA 表达量水平检测和基因拷贝数检测。实验的方法可分为SYBR Green I 法和TaqMan探针法,测定灵敏、特异性强,易于使用。
实验流程:
服务项目:
对待测样品进行某一特定基因的检测并确定待测基因相对于某一特定管家基因以及该基因在实验组中相对于对照组的相对表达情况。参考基因和靶基因表达分析,包括RNA提取、反转录和扩增,一般采用SYBR Green I法,2-ΔΔCt法进行计算。每个样本重复三次,一般情况我公司提供内参基因引物。
mRNA荧光定量检测:
服务编号 |
服务内容 |
GN21151 |
mRNA引物设计合成验证 |
GN21152 |
RNA提取及反转录(简单样品) |
GN21153 |
RNA提取及反转录(复杂样品) |
GN21154 |
mRNA qPCR检测(>100个样品,>5个基因) |
GN21155 |
mRNA qPCR检测(50-100个样品,>5个基因) |
GN21156 |
mRNA qPCR检测(10-50个样品,>5个基因) |
GN21157 |
mRNA qPCR检测(5-10个样品,>5个基因) |
备注:
1. 内参基因免费(少于5个基因内参按照一个基因收费),RNA电泳抽检免费,数据分析整理免费。
2. 实验剩余样品,RNA,cDNA如需返还,需收取干冰邮寄样品费用200元。
送样要求:
1. 样品要求:细胞(≥106)、组织(≥300mg)、血液(≥1ml)、叶片(≥100mg)等样品材料,基因组DNA,cDNA不少于30 μg,总RNA(体积≥20μl,浓度≥100 ng/μl)。组织需液氮速冻、细胞收获后加入Trizol保存于-80度,样品需用干冰寄送,避免各类污染和反复冻融。
2. 详细填写技术服务表单,根据客户所填写表单信息分析实验,报价和周期;
客户信息:开票信息,联系方式等;
靶基因信息:包括基因序列或GenBank Accession Number 等;
背景资料:包括生物物种信息(Human、Mouse、Rat 等)、目的基因NCBI登录号、DNA/RNA 来源、相关文献等。
提交结果:
完整实验报告,包括扩增曲线,标准曲线,溶解曲线,引物和探针及序列,电泳图,CT值,原始数据,数据分析结果等。