Matrigel基质的主要成分是层粘连蛋白,接着是胶原蛋白Ⅳ、硫酸乙酰肝素蛋白多糖和巢蛋白。康宁基底膜基质也含有转化生长因子β、表皮生长因子、类胰岛素生长因子、成纤维细胞生长因子、组织纤溶酶原激活物和在EHS 肿瘤中自然出现的其他生长因子。
Matrigel基质对正常和变换的锚定依赖型上皮样细胞和其他细胞类型的附着和分化是有效的。这些细胞类型包括神经元、肝细胞、支持细胞、小鸡晶状体上皮细胞和血管内皮细胞。
应用:
1、3D培养:成年大鼠肝细胞、血管内皮细胞以及小鼠和人乳腺上皮细胞的3D细胞培养中,康宁基底膜基质会影响基因的表达。
2、肿瘤细胞侵袭:基质胶是该实验的基础,支持体内末梢神经再生,并提供体外和体内血管再生研究的必需底物。
3、体内实验:与肿瘤细胞混合后,可以直接注射到实验动物体内。支持免疫抑制小鼠中体内人类肿瘤的增殖。还能用于未分选乳腺细胞的移植,以及分选的上皮细胞亚群嵌入基质。
4、肿瘤研究:也被作为癌症干细胞模型,并被证明能在体内增强肿瘤生长速率。
来源: Engelbreth-Holm-Swarm (EHS)小鼠肿瘤
制剂: 含有50 μg/mL 庆大霉素的达尔伯克改良伊格尔培养基。康宁基底膜基质适合所有的培养基。
储存:
储存在-20°C 时是稳定的。应该通过分装并使用一次性分装物来最小化产品的冻融。在-20°C 冰箱中储存分装物直到准备使用。请不要储存在无霜冰箱中。请保持产品的冻结。
Matrigel基质会有色差变化(淡黄色到深红色),是由于酚红和碳酸氢盐与CO2作用引起的,但是与5%CO2平衡后色差即会减少。冻融后,轻轻摇晃试剂瓶使Matrigel分散均匀。所有操作均需在无菌环境下进行,试剂瓶瓶盖可用70%乙醇擦拭,并自然干燥。应使用预冷的移液器以保证Matrigel呈匀浆状。
有效日期: 康宁基底膜基质的有效日期是批次特异的,您可以在产品的分析证明书中找到。
警告:
因为康宁基底膜基质在10°C 以上会开始凝胶化,所以极其重要的是康宁基底膜基质和所有的进入与康宁基底膜基质接触的培养皿或培养基都应该预冷/冰冻。在实验的全部过程中请保持康宁基底膜基质处于冰上。
薄胶成胶方法:
1.冻融后,用预冷的移液枪头混匀Matrigel基质成匀浆状。
2.将需要使用的培养板置于冰上,加入浓度为50μL/cm2生长面积的Matrigel基质。
3.在37℃放置30分钟,即可使用。
厚胶成胶方法:
1.冻融后,用预冷的移液枪头混匀Matrigel基质成匀浆状。
2.将需要使用的培养板置于冰浴,将培养的细胞与Matrigel基质混合,用移液枪头使其悬浮于基质中。加入浓度为150-200μL/cm2生长面积的Matrigel基质。
3.在37℃放置30分钟,可成胶。可以加入细胞培养的基质,也可使细胞直接生长在胶表面。
薄层包被方法:
1.冻融后,用预冷的移液枪头混匀Matrigel基质成匀浆状。
2.根据使用需要,采用无血清培养基稀释Matrigel基质。根据实验需要确定最佳包被浓度。
3.将稀释的Matrigel基质包被于所需的培养器皿中,包被量至少覆盖整个器皿的生长表面。室温下孵育1小时。
4.去除未结合的Matrigel,用无血清培养基轻轻地冲洗。