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Matrigel高浓度型基质胶,无酚红
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商家描述 包装清单 产品评价(0)
  Matrigel基质是一种可溶性的基底膜制剂,这种基质是从Engelbreth-Holm-Swarm (EHS)小鼠肉瘤,一种富含细胞外基质蛋白的肿瘤中抽提出来的。高浓度无酚红的Matrigel基质胶浓度一般在18-22mg/ml

 

     Matrigel基质的主要成分是层粘连蛋白,接着是胶原蛋白Ⅳ、硫酸乙酰肝素蛋白多糖和巢蛋白。康宁基底膜基质也含有转化生长因子β、表皮生长因子、类胰岛素生长因子、成纤维细胞生长因子、组织纤溶酶原激活物和在EHS 肿瘤中自然出现的其他生长因子。

 

      Matrigel基质对正常和变换的锚定依赖型上皮样细胞和其他细胞类型的附着和分化是有效的。这些细胞类型包括神经元、肝细胞、支持细胞、小鸡晶状体上皮细胞和血管内皮细胞。

 

制剂: 含有50 μg/mL 庆大霉素的达尔伯克改良伊格尔培养基。康宁高浓度无酚红基底膜基质适合所有的培养基。

 

有效日期: 康宁基底膜基质的有效日期是批次特异的,您可以在产品的分析证明书中找到。

储存:

   储存在-20°C 时是稳定的。应该使用一次性预冷的容器来最小化分装产品,并立即复冻。一旦基质被解冻,请涡旋小瓶以确保材料的均匀分散。请使用无菌技术处理。请将解冻的康宁高浓度无酚红基底膜基质放置在无菌的区域,在小瓶的顶部喷洒70%的乙醇并风干。使用预冷的移液管轻柔的吸取基质以确保其均匀性。

    将基质分装到离心管中,每当基质堵塞吸头和/或移液管测量不精确 时请更换吸头。如果将材料放置在4°C 的冰上24-48 个小时,凝胶化的基质可能会被重新水化。

在-20°C 冰箱中储存分装物直到准备使用。请不要储存在无霜冰箱中。请保持产品的冻结。

     Matrigel基质会有色差变化(淡黄色到深红色),是由于酚红和碳酸氢盐与CO2作用引起的,但是与5%CO2平衡后色差即会减少。冻融后,轻轻摇晃试剂瓶使Matrigel分散均匀。所有操作均需在无菌环境下进行,试剂瓶瓶盖可用70%乙醇擦拭,并自然干燥。应使用预冷的移液器以保证Matrigel呈匀浆状。     

请避免多次冻融。请不要保存在无霜冰箱中。

 

 

使用方法:

高浓度无酚红基底膜基质可以被用来作薄层凝胶(0.5 mm),细胞可以接种在其顶部。当作为1 mm 凝胶层使用时,细胞也可以在基质的内部培养。大量的稀释将会导致1 个薄的、非凝胶化的蛋白层。这对于细胞附着是有用的,但是在分化研究中可能不起作用。

通过皮下注射进小鼠(康宁人工基底膜栓实验)高浓度无酚红基底膜基质可以用来评估体内不同化合物的血管再生活力。高蛋白浓度增加了肿瘤的生长并且在注射之后允许Corning® Matrigel®栓维持其完整性。对于原位分析和/或之后的切除,这保持了注射的肿瘤和/或血管生成化合物的定位。

 

警告:

高浓度基底膜基质在22°C 到35°C 会快速凝胶化。请在冰上4°C 过夜解冻(在冰箱中轻微提高温度基底膜基质可能会凝胶化)。当准备使用康宁高浓度基底膜基质时,在使用前请保持产品放置在冰上,请使用预冷的移液管、吸头和试管。如果放置在冰上4°C  24-48 小时,凝固的康宁高浓度基底膜基质可能被重新水化。

 

注射方法:

1. 在注射入小鼠之前,重要的是保持康宁高浓度基底膜基质和康宁基底膜基质/细胞悬液尽可能的冰冷,但不要冻结。在执行程序的全过程中最重要的是保持尽可能无菌。

2. 对每一个受体小鼠,在冰上混合细胞(2x105 或更高)和康宁高浓度基底膜基质,终体积为0.5 ml。

3. 细胞的体积应该尽可能的小。通常,含有2x106 个细胞/ml 的250μl 冰冷的培养基将和250 μl 冰冷的康宁高浓度基底膜基质混合。

4. 对于组织样品使用19G 针,对于培养的细胞使用23G 针来对无胸腺小鼠进行皮下注

射。注射应该尽快完成以防止基底膜基质凝固。

5. 当取出针头时请旋转注射器以防止渗漏。由于凝胶堵塞针头需要频繁更换。

 

细胞复苏:

使用康宁细胞复苏溶液——中性蛋白酶(商品目录号354235),康宁细胞复苏溶液(商品目录号354253)可以实现生长在康宁高浓度基底膜基质上的细胞最有效的复苏,在

冰上康宁细胞复苏溶液和中性蛋白酶可以在7 小时内解聚基底膜基质,中性蛋白酶是一种金属酶可以在连续培养中轻柔的释放细胞。

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