
DH5α Chemically Competent Cell
目录号:RB-DH
产品规格:
DH5α: 100 μl×10支
pUC19(control vector):10 μl(10 pg/μl)
基因型:
F - φ80lacZΔM15 Δ(lacZYA-arg F) U169 endA1 recA1 hsdR17 (rk-,mk+ ) supE44 λ-thi-1 gyrA96 relA1 phoA
产品说明:
DH5α菌株缺失核酸内切酶(endA),提高了质粒DNA的产量和质量;重组酶缺陷型(recA)减少插入片段的同源重组概率,保证了插入DNA的稳定性;lacZ△M15 的存在使DH5α可用于蓝、白斑筛选。本制品经特殊工艺制作,使用pUC19质粒DNA检测,转化效率高达1×109 cfu/ μ g。
注意事项:
1)本产品应保存在-80℃,不可反复冻融,以免降低感受态细胞的转化效率。
2)本产品在冰中解冻时间不宜过长,感受态刚化冻时转化效率最高。
3)本产品使用传统转化方法转化效率约1×109 cfu/μg,使用快速转化方法转化效率约107cfu/μg。
推荐使用方法:
取100μl冰浴上融化的感受态细胞,加入目的DNA(质粒或连接产物,所加体积不超过感受态细胞的十分之一),轻轻混匀,冰上静置8-30 min。
42℃水浴热激30-45 s,迅速转移至冰浴中,静置2 min(晃动会降低转化效率)。
向离心管中加入300μl不含抗生素的无菌培养基,轻轻混匀后37℃,200 rpm摇床复苏40-60min。
根据实验需要,吸取不同体积的复苏液均匀涂布到含相应抗生素的培养皿上,晾干后将培养皿倒置放于37℃培养箱过夜培养。
保存条件: 干冰运输,-80℃ 保存6个月。